免疫親和柱

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黃曲霉毒素免疫親和柱
黃曲霉毒素免疫親和柱
詳細(xì)說明:

黃曲霉毒素免疫親和柱

簡介

    AFT免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、限量要求低的樣品中黃曲霉毒素B1B2,G1,G2檢測的凈化??梢赃M(jìn)行TLC、HPLCGC、LC-MS/MS、EIA的定量分析,適用于谷物,食品,飼料等的樣品凈化過程

柱容量  200ng 黃曲霉毒素

儲存條件  2-8冷藏保存,不可冷凍

用途

用于實驗室凈化樣品提取物以進(jìn)行進(jìn)一步分析

概要

黃曲霉毒素是谷類及其他農(nóng)作物常見的霉變菌,是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類低分子化合物。污染糧食、油料作物的種子,其中以花生、玉米易被污染,另外在小麥、高粱、巴西堅果、豆類和大米等重要糧食中也經(jīng)常被檢出。

黃曲霉毒素?zé)岱€(wěn)定性很高,一旦產(chǎn)生便難以除去。對動物、植物和微生物具有很強(qiáng)的毒性,致癌力強(qiáng),還能引起突變和導(dǎo)致畸形。

黃曲霉毒素作為肝癌的三大誘因之一,也是胃癌,腸癌等疾病的主要原因,對人類的健康構(gòu)成很大威脅。世界各國對食品,飼料中的黃曲霉毒素都有嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)。

原理

測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),免疫親和柱中含有和黃曲霉毒素抗體結(jié)合在一起的凝膠,樣品中的黃曲霉毒素經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢的通過黃曲霉免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi)黃曲霉毒素與抗體結(jié)合,其他的無關(guān)物質(zhì)不會結(jié)合而直接通過免疫親和柱,之后洗滌免疫親和柱完全除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。后加入甲醇將黃曲霉毒素釋放,然后注入到分析儀器中進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。

提供的試劑

25支/盒免疫親和柱,規(guī)格:1ml/3ml

5  操作者應(yīng)注意事項

黃曲霉毒素對人體有害,應(yīng)戴手套操作。

使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液宜用5%濃度的次氯酸溶液浸泡過夜。

不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

親和柱于2-8冷藏保存,不可冷凍

使用前,免疫親和層析柱需回至室溫(22~25℃)

操作流程(符合GB/T 18979-2003國標(biāo)方法)

粉碎好的樣品過20目篩并在取樣前徹底混合,不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存。

稱取20g粉碎樣品及4g氯化鈉,加入100ml 70%甲醇/水。

高速均質(zhì)約2分鐘,或震蕩器震蕩約30分鐘,

過濾樣品至少10ml。

10ml濾液加入20ml水,徹底混合。

用玻璃纖維濾紙過濾至澄清,取15ml準(zhǔn)備加入到免疫親和柱中過柱。

10ml注射器連接于免疫親和柱上端。

處理好的樣品液15ml1-2/秒的速度通過免疫親和柱,棄掉流出的液體。

10ml水淋洗柱子兩次,棄掉流出的液體,

利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱子中的水。

加入1ml甲醇緩慢洗脫,流速約為2-3秒每滴。

收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。

7 操作流程圖

免疫親和小柱操作流程

8 液相色譜測定條件

● 激發(fā)/發(fā)射波長:360nm/440nm

● 流動相:甲醇-水(45+55)

● 流速:0.8mL/min

● 進(jìn)樣量:20ul 

● 柱溫:30°

● 反應(yīng)時間:10min

用進(jìn)樣器吸取20μL黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)工作液注入HPLC

色譜儀,在上述色譜條件下測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的響

應(yīng)值(峰高或峰面積),得到黃曲霉毒素B1、B2、 

G1、G2標(biāo)準(zhǔn)溶液HPLC色譜圖

免疫親和小柱色譜圖

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服務(wù)時間:
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